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所用的維生素B1都是化學合成的產品。在細胞內 ，維生素B1的生物活性形式為硫胺素焦磷酯（thiamine pyrophosphate，TPP），TPP是丙酮酸脫氫酶復合體 （pyruvate dehydrogenase complex， PDHC）、α- 酮戊二酸脫氫酶復合體 （α-ketoglutarate dehydrogenase complex，KGDHC）和磷酸戊糖途徑的轉酮醇酶（tran-sketolase， TK）反應中的重要輔助因子。PDHC和KGDHC是細胞利用葡萄糖產生ATP途徑的重要組成部分；TK則是糖異生的關鍵酶。作為糖酵解中兩種關鍵性催化酶類的輔酶，硫胺素對葡萄糖代謝具有重要的作用。此外，體內氧化還原反應的主要成分還原型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸 （reduced nicotinamide adenine dinucleotide，NADH）、還原型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸 （reduced nicotinamide adeninedinucleotide phosphate，NADPH）和谷胱甘肽都是在以焦磷酸硫胺素為輔助因子的酶促反應過程中產生的。硫胺素在維持腦內氧化代謝平衡方面，如脂質過氧化產物水平和谷胱甘肽還原酶活性方面發揮重要作用。另外，以焦磷酸硫胺素作為輔酶的酶還參與了氨基酸合成以及其他過程中有機化合物的合成過程。