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化學合成法的特點是生產成本高，反應復雜，步驟多，且有許多副產物。用異丁醛作原料，有多種方法可合成外消旋體纈氨酸。例如異丁醛與氨生成氨基異丁醇，再與氰化氫合成氨基異丁腈，然后水解得到纈氨酸，外消旋體的拆分也有多種方法，例如用酰基-DL-氨基酸的酶進行水解，再利用游離氨基酸與酰化體的溶解度差進行分離。

微生物發酵法生產具有原料成本低，反應條件溫和及可大規模生產等優點，是一種非常經濟的生產方法，發酵法生產的纈氨酸皆為L-型，無需旋光拆分。發酵法的菌種為產谷氨酸微球菌，產氨短桿菌，大腸桿菌，產氣氣桿菌。用葡萄糖、尿素、無機鹽等培養基。

標定：取在105℃干燥至恒重的基準鄰苯二甲酸氫鉀約0.16g，精密稱定，加無水冰醋酸20mL使溶解，加結晶紫指示液1滴，用本液緩緩滴定至藍色，并將滴定的結果用空白試驗校正。每1mL高氯酸滴定液（0.1mol/L）相當于20.42mg的鄰苯二甲酸氫鉀。根據本液的消耗量與鄰苯二甲酸氫鉀的取用量，算出本液的濃度，即可。

貯藏：置棕色玻璃瓶中，密閉保存。

操作步驟： 取本品約0.10g，精密稱定，加無水甲酸1mL溶解后，加冰醋酸25mL，照電位滴定法，用高氯酸滴定液（0.1mol/L）滴定，并將滴定結果用空白試驗校正。每1mL高氯酸滴定液（0.1mol/L）相當于11.72mg的C5H11NO2 。

注1：“精密稱取”系指稱取重量應準確至所稱取重量的千分之一,“精密量取”系指量取體積的準確度應符合國家標準中對該體積移液管的精度要求。