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取DL-蘇氨酸粗品42g，加126ml水加熱使全溶，脫色過濾取濾液，加入252ml乙醇，冷卻過夜，過濾取結晶得精制DL-蘇氨酸。收率87%-91.3%。

拆分、精制 將精制的DL-蘇氨酸810g、DL-蘇氨酸90g、水2.88L混合，緩緩攪拌（約50r/min），并加熱至95℃以上使其全部溶解。再降溫至40℃，并加入DL-蘇氨酸總投料量的10%的D-蘇氨酸作品種，緩慢冷卻至30℃（平均每15min降1℃），析出結晶D-蘇氨酸，過濾取結晶，并與80℃干燥，得D-蘇氨酸。收集濾液，投入與拆分出的D-蘇氨酸等量的DL-蘇氨酸（約150-170g），保持總體積不變，同拆分D-蘇氨酸同樣的操作（但降低溫度至40℃時，加入的晶種為L-蘇氨酸），得L-蘇氨酸。如此反復操作，即可將D-蘇氨酸和L-蘇氨酸拆分開。

合并相應的D-蘇氨酸粗品和L-蘇氨酸粗品，分別進行精制，即重結晶。分別取D和L-型蘇氨酸，分別加水4倍，加熱90℃至全溶，1%活性炭脫色，趁熱過濾收集濾液，分別加入2倍體積的乙醇靜置冷卻，不時攪拌，析出結晶，得D-蘇氨酸和L-蘇氨酸精品，收率87.3%-91.6%。

L-蘇氨酸的含量在95%以上，[α]20D-26°--29°，紙層析呈現一個斑點。